DNA ricombinante sono molecole di DNA che hanno frammenti di DNA derivati da due o più fonti, solitamente di specie diverse.
IL clonazione molecolare è la tecnica centrale della metodologia del DNA ricombinante e consiste nel trasferimento di un gene da un organismo all'altro, cioè la ricombinazione di DNA da fonti diverse.
Tecnologia del DNA ricombinante
La procedura di solito prevede il isolamento di un gene umano con potenzialità terapeutiche (es. insulina) e l'introduzione di quel gene in una cellula animale, batterica o di lievito.
Attraverso l'uso di proteine chiamate enzimi di restrizione, i singoli geni vengono isolati dal DNA umano e inseriti in piccoli pezzi di DNA tagliati con lo stesso enzima, chiamato plasmidi.
Il plasmide ricombinante viene quindi inserito in una cellula animale, batterica o di lievito, in un processo chiamato trasformazione.
I geni di resistenza ai farmaci, che si trovano anche sul plasmide, selezionano le cellule trasformate da quelle non trasformate.
Viene quindi stabilita una popolazione pura di cellule ricombinanti attraverso il processo di
clonazione, dove una singola cellula selezionata darà origine a una popolazione di cloni.Alla fine del processo, tutte le cellule risultanti dovrebbero contenere una copia del plasmide che trasporta il gene umano inserito.
Dopo che il gene e la cellula clonata sono stati inseriti, le cellule vengono quindi indotte ad esprimere il gene umano.
Applicazioni della tecnologia del DNA ricombinante
- Produzione di sostanze utili come insulina umana, ormone della crescita, vaccini, enzimi industriali;
- Studio dei meccanismi di replicazione ed espressione genica;
- indagine di paternità;
- Diagnosi di malattie genetiche e infettive;
- terapia genetica;
- Transgenici.
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