დნმ ფრაგმენტების სინთეზი

მაგრამ როგორ ამოვიცნოთ ფრაგმენტების პოზიცია? ამისათვის აუცილებელია "ზონდის" გამოყენება, ანუ დნმ-ის მცირე ფრაგმენტი, რომელსაც ასახულია რადიოაქტიური იზოტოპი ან რადიკალი, რომელიც გარკვეულ პირობებში ასხივებს სინათლეს. ასევე, დნმ-ის ფრაგმენტი, ზონდი შეიცავს თანმიმდევრობას, რომელიც ავსებს მხოლოდ ერთი ტიპის უცვლელი თანმიმდევრობით, რომელიც უკვე ცნობილია შესწავლილ ფრაგმენტში, რაც საშუალებას მისცემს ორივეს დააკავშიროს.

ფოტოგრაფიული ფილმის გამოყენებით, აღმოჩენილია ზონდის და, შესაბამისად, ფრაგმენტის პოზიცია. ერთჯერადი საიტების შემთხვევაში - რომლებიც მხოლოდ ერთხელ გვხვდება მთელ გენომში - ყოველთვის არის ორი "ალელი", რადგან უჯრედებს (გარდა რეპროდუქციული) აქვთ თითო წყვილი თითოეული ქრომოსომისა. ვინაიდან ალელებს აქვთ ერთი და იგივე ძირითადი თანმიმდევრობა და განსხვავებული ზომები, ამ მიმდევრობის დამატებითი ზონდი ორივეს უკავშირდება და ისინი სხვადასხვა პოზიციებზე გამოჩნდებიან ფოტოგრაფიულ ფილმზე. ყველა ადამიანი დედისგან იღებს ამ ალელებს და ერთსაც მამა.

ამიტომ, მამობის ტესტში საკმარისია შევადაროთ დედის, მისი ვაჟის (ა) და სავარაუდო მამის ალელები და ბავშვის მამის ალელის დამთხვევა სავარაუდო მამის ალელთან დაადასტურებს მამობას "ბიოლოგიური". როდესაც მხოლოდ ადამიანის ვინაობის გამოძიება გინდა (მაგალითად, კრიმინალი), ეს უნდა გააკეთო შეადარეთ დანაშაულის ადგილზე მიღებული დნმ-ის ნიმუშების პოლიმორფიზმის ნიმუში რამდენიმე ნიმუშთან ეჭვმიტანილები.

დნმ ფრაგმენტების სინთეზი

პოლიმორფიზმის დასადგენად გამოიყენება პრაიმერები, რომლებიც დნმ-ის მხარეებს, სადაც ნუკლეოტიდების განმეორებებია (ორი, სამი ან მეტი ჯგუფში). ეს ნიშნავს, რომ ასეთი პრაიმერები განასაზღვრებენ ახალი ძაფების სინთეზს მონაკვეთამდე და გამეორებებით განლაგებულ საიტებს შორის, სადაც ისინი სავალდებულოა. ასეთ გამეორებებს STR (მოკლე ტანდემის გამეორება, ან ”მოკლე გამეორება სერიაში”) ეწოდება, ხოლო რეგიონები, სადაც ისინი გვხვდება, ცნობილია როგორც ”მიკროსატელიტები”.

მიტოქონდრიული დნმ

უჯრედების ბირთვში არსებული გენომური დნმ-ის გარდა, დნმ არის მიტოქონდრიებშიც, ციტოპლაზმაში განლაგებული ორგანელებით. ეს დნმ გაცილებით მცირეა ვიდრე ბირთვული და აქვს წრიული სტრუქტურა, რაც მას უფრო ჰგავს ბაქტერიებისას.

სასამართლო ექსპერტიზის კონტექსტში, მიტოქონდრიული დნმ – ისადმი ინტერესი გაჩნდა რამდენიმე მიზეზის გამო: პირველი, ეს დნმ ასევე შეიცავს პოლიმორფულ რეგიონებს, რომლებიც იძლევა მის ინდივიდუალიზაციას; მეორე, შთამომავლები იღებენ ამ დნმ-ს მხოლოდ დედისგან, რაც შესაძლებელს ხდის პირის დედის ნათესაობის კვალს; და მესამე, ეს დნმ უფრო მდგრადია დეგრადაციის მიმართ, ვიდრე ბირთვული დნმ. ამრიგად, დიდ კატასტროფებში (ხანძრები, აფეთქებები, თვითმფრინავების ჩამოვარდნა და ა.შ.), როდესაც უფრო რთულია ცხედრების ამოცნობა, ხდება მიტოქონდრიული დნმ-ის ანალიზი. ეს ნაშთებიდან არის მოპოვებული და ინტერესის მიმდევრობა შედარებულია და-ძმის ან დედის წინაპრებისგან მიღებულ თანმიმდევრობასთან.

დნმ ტესტირების საიმედოობა

ლაბორატორიებსა და დნმ-ს ტესტირების სააგენტოებს შორის ინტენსიური დისკუსიის გამომწვევი ერთი საკითხია პოლიმორფული ადგილების რაოდენობა, რაც საჭიროა იდენტურობისა და მამობის საიმედოდ დასადგენად. დასკვნებისთვის გამოყენებული ინდექსი, როგორც პიროვნების პიროვნებაზე, ასევე მამობაზე, დამოკიდებულია ანალიზირებული ლოკების რაოდენობაზე. ადექვატური ინდექსის მისაღწევად, საჭიროა გაითვალისწინოთ ალელების სიხშირე პოპულაციაში: თუ ისინი ძალიან ხშირია, ანალიზების შედეგები, სულ მცირე, საეჭვო იქნება.

მაგალითად შეიძლება გამოყენებულ იქნას სისხლის ჯგუფები (A, B, O და AB). ასეთი ჯგუფები, რომლებიც დამოკიდებულია ალელების კომბინაციაზე, განაწილებულია ცნობილი სიხშირეების მქონე პოპულაციებში. გერმანიაში 46% -დან 48% -ს აქვს A ტიპის სისხლი. ცენტრალურ ევრაზიაში, ინდოეთში, მონღოლეთსა და ციმბირში B ტიპი ჭარბობს. აქედან არც ერთ რეგიონში არ შეიძლებოდა ამ სისხლის ჯგუფების ცალკეული გამოყენება ინდივიდუალური პირის დასადგენად, რადგან მოსახლეობის დიდ პროცენტს ექნებოდა ერთი ან მეორე. მნიშვნელოვანია, რომ გამოკვლეული ალელები იშვიათია.

დნმ პოლიმორფიზმის შემთხვევაში (RFLP) სიხშირეები გაცილებით დაბალია. მაგალითისთვის, წარმოვიდგინოთ რიო-დე-ჟანეიროში, სადაც D10S28 ლოკუსია, მამობის საკითხზე დავა როგორც გამოკვლევა, რომელიც საშუალებას იძლევა სავარაუდო მამაში მიიღონ ალელი, რომელიც გვხვდება რიო-დე-ჟანეიროს მოსახლეობის დაახლოებით 2,8% -ში. ეს მნიშვნელობა ძალიან მაღალია, თუ გავითვალისწინებთ, რომ ქალაქის მოსახლეობა დაახლოებით 8 მილიონი მოსახლეა. ამ მნიშვნელობის შესამცირებლად საჭიროა სხვა ინდივიდების ძებნა იმავე პიროვნებაში. წარმოვიდგინოთ, რომ მეორე ანალიზმა, D2S44 ლოკუსის გამოყენებით, გამოავლინა ალელი 7,28% სიხშირით, პროცენტული მაჩვენებელი რიო დე ჟანეიროში ამ ალელით 582,000 ადამიანის არსებობაზე მიუთითებს.

რამდენ ინდივიდს ექნება ორივე ალელი? მხოლოდ 16,307. ეს რიცხვი მიიღება ორი სიხშირის ინვერსიის გამრავლებით: 2.8 / 100 x 7.28 / 100 x 8 მილიონი. კიდევ ერთი ლოკოს გამოყენებით, ანალიზი მიუთითებს სხვა სიხშირეზე, რომელიც საშუალებას მოგცემთ კიდევ უფრო შეამციროთ პროცენტული მაჩვენებელი. პრაქტიკაში, ხუთიდან შვიდი ზონდის გამოყენება წარმოქმნის მნიშვნელობას საკმარისად დაბალ, რომ შედეგი საბოლოო იყოს.

წყარო: ბრაზილიის სკოლა - https://brasilescola.uol.com.br/biologia/sintese-fragmentos-dna.htm