Ama parçaların konumu nasıl tanınır? Bunun için bir "sonda", yani radyoaktif izotop veya belirli koşullar altında ışık yayan bir radikal ile etiketlenmiş küçük bir DNA parçası kullanmak gerekir. Aynı zamanda bir DNA parçası olan sonda, incelenen parçada zaten bilinen ve her ikisinin bağlanmasına izin verecek olan, yalnızca bir tür değişmez diziyi tamamlayan bir dizi içerir.
Fotoğraf filminin kullanılmasıyla, probun konumu ve dolayısıyla parçanın konumu keşfedilir. Tüm genomda yalnızca bir kez meydana gelen tek bölgeli siteler durumunda, her zaman iki "alel" vardır, çünkü hücreler (üreme olanlar hariç) her kromozomdan bir çifte sahiptir. Aleller aynı temel diziye ve farklı boyutlara sahip olduğundan, bu diziyi tamamlayan bir prob her ikisine de bağlanacak ve fotoğraf filmi üzerinde farklı konumlarda görünecektir. Bütün insanlar bu alellerden birini anneden, bir de babadan alır.
Bu nedenle babalık testinde annenin, çocuğunun (a) ve sözde babanın alellerini karşılaştırmak yeterlidir ve Çocuğun baba aleli ile sözde babanın alelinin çakışması babalığı doğrulayacaktır. "biyolojik". Yalnızca bir kişinin (örneğin bir suçlunun) kimliğini araştırmak istediğinizde, suç mahallinde elde edilen DNA örneklerinin polimorfizm modelini birkaç şüpheliler.
DNA parçalarının sentezi
Polimorfizmi tespit etmek için, DNA'nın nükleotid tekrarlarının (iki, üç veya daha fazla gruplar halinde) olduğu yan bölgeleri olan primerler kullanılır. Bu, bu tür primerlerin, bağlandıkları siteler arasında yer alan tekrarlarla yeni ipliklerin sentezini gerginliğe sınırlandırdığı anlamına gelir. Bu tür tekrarlara STR (Kısa Tandem Tekrarlar veya “serilerdeki kısa tekrarlar”) ve bulundukları bölgelere “mikro uydular” denir.
mitokondriyal DNA
Hücre çekirdeğinde bulunan genomik DNA'ya ek olarak, sitoplazmada bulunan organeller olan mitokondride de DNA vardır. Bu DNA nükleerden çok daha küçüktür ve dairesel bir yapıya sahiptir, bu da onu bakterilerinkine daha çok benzetir.
Adli analiz bağlamında, mitokondriyal DNA'ya ilgi birkaç nedenden dolayı ortaya çıktı: birincisi, bu DNA ayrıca bireyselleşmesine izin veren polimorfik bölgeler de içeriyor; ikincisi, torunlar bu DNA'yı yalnızca anneden alır, bu da bir kişinin annelik soyunun izini sürmeyi mümkün kılar; ve üçüncüsü, bu DNA bozulmaya nükleer DNA'dan daha dirençlidir. Bu nedenle büyük afetlerde (yangın, patlama, uçak kazası vb.), cesetleri teşhis etmenin daha zor olduğu durumlarda mitokondriyal DNA analiz edilir. Bu, kalıntılardan çıkarılır ve ilgilenilen dizi, kardeşlerden veya anne atalarından elde edilen dizilerle karşılaştırılır.
DNA Testinin Güven Derecesi
Laboratuvarlar ve DNA test kurumları arasında yoğun tartışmalara yol açan bir nokta, güvenilir bir şekilde kimlik ve babalık kurmak için gereken polimorfik lokusların sayısıdır. Hem bir kişinin kimliğine hem de babalığa ilişkin sonuçlar için kullanılan indeks, analiz edilen lokusların sayısına bağlıdır. Ancak yeterli bir indekse ulaşmak için popülasyondaki alellerin sıklığını hesaba katmak gerekir: eğer çok yaygınlarsa, analizlerin sonuçları en azından şüpheli olacaktır.
Kan grupları (A, B, O ve AB) örnek olarak kullanılabilir. Alellerin kombinasyonuna bağlı olan bu tür gruplar, dünya çapında bilinen frekanslarla popülasyonlara dağılmıştır. Almanya'da %46 ila %48'i A tipi kana sahiptir. Orta Avrasya, Hindistan, Moğolistan ve Sibirya'da B tipi hakimdir. Bu nedenle, bu bölgelerin hiçbirinde, bu kan grupları bir bireyi tanımlamak için tek başına kullanılamaz, çünkü nüfusun büyük bir yüzdesi bunlardan birine sahip olacaktır. Araştırılan alellerin nadir olması önemlidir.
DNA polimorfizmleri (RFLP'ler) durumunda, frekanslar çok daha düşüktür. Örnek olarak, Rio de Janeiro'da D10S28 lokusunun kullanıldığı bir babalık anlaşmazlığını düşünelim. bir araştırma olarak, sözde babada Rio de Janeiro nüfusunun yaklaşık %2.8'inde meydana gelen bir alel elde edilmesini sağlar. Şehrin nüfusunun 8 milyon civarında olduğunu düşünürsek bu değer çok yüksek. Bu değeri azaltmak için aynı bireyde başka lokuslar aramak gerekir. D2S44 lokusunu kullanan ikinci bir analizin, %7,28 sıklıkta bir alel ortaya çıkardığını, bu alel ile Rio de Janeiro'da 582.000 kişinin varlığını gösteren bir yüzde olduğunu düşünelim.
Fakat her iki alel de kaç kişide bulunur? Sadece 16.307. Bu sayı, iki frekansın tersinin çarpılmasıyla elde edilir: 2.8/100 x 7.28/100 x 8 milyon. Bir lokomotif daha kullanarak, analiz başka bir frekansı gösterecek ve yüzdeyi daha da azaltmanıza izin verecektir. Pratikte, beş ila yedi prob kullanmak, sonucun kesin olması için yeterince düşük bir değer üretir.
Kaynak: Brezilya Okulu - https://brasilescola.uol.com.br/biologia/sintese-fragmentos-dna.htm