Recombinant DNA zijn DNA-moleculen met DNA-fragmenten die zijn afgeleid van twee of meer bronnen, meestal van verschillende soorten.
DE moleculair klonen het is de centrale techniek van de recombinant-DNA-methodologie en bestaat uit de overdracht van een gen van het ene organisme naar het andere, dat wil zeggen de recombinatie van DNA uit verschillende bronnen.
Recombinante DNA-technologie
De procedure omvat meestal de isolatie van een menselijk gen met therapeutisch potentieel (bijv. insuline) en de introductie van dat gen in een dierlijke, bacteriële of gistcel.
Door het gebruik van eiwitten genaamd restrictie-enzymen, worden individuele genen geïsoleerd uit menselijk DNA en ingebracht in kleine stukjes DNA die met hetzelfde enzym zijn geknipt, genaamd plasmiden.
Het recombinante plasmide wordt vervolgens ingebracht in een dierlijke, bacteriële of gistcel, in een proces genaamd transformatie.
Geneesmiddelresistentiegenen, die ook op het plasmide worden gevonden, selecteren getransformeerde cellen uit niet-getransformeerde.
Een zuivere populatie van recombinante cellen wordt dan tot stand gebracht door het proces van klonen, waarbij een enkele geselecteerde cel aanleiding zal geven tot een populatie van klonen.
Aan het einde van het proces wordt verwacht dat alle resulterende cellen een kopie bevatten van het plasmide dat het geïnsereerde menselijke gen draagt.
Nadat het gen en de gekloonde cel zijn ingevoegd, worden de cellen vervolgens geïnduceerd om het menselijke gen tot expressie te brengen.
Toepassingen van recombinant-DNA-technologie
- Productie van nuttige stoffen zoals humane insuline, groeihormoon, vaccins, industriële enzymen;
- Studie van genreplicatie- en expressiemechanismen;
- vaderschapsonderzoek;
- Diagnose van genetische en infectieziekten;
- gentherapie;
- Transgenen.
meer weten over eiwitten gaat over DNA.