DNAフラグメントの合成

しかし、フラグメントの位置を認識する方法は? このためには、「プローブ」、つまり放射性同位元素または特定の条件下で発光するラジカルで標識されたDNAの小さな断片を使用する必要があります。 DNAフラグメントでもあるこのプローブには、研究中のフラグメントに存在する既知の1種類の不変配列のみを補完する配列が含まれているため、両方の結合が可能になります。

写真フィルムを使用して、プローブの位置、したがってフラグメントの位置が発見されます。 ゲノム全体で1回だけ発生する単一部位部位の場合、細胞(生殖細胞を除く)には各染色体のペアが1つあるため、常に2つの「対立遺伝子」が存在します。 対立遺伝子は同じ基本配列と異なるサイズを持っているため、その配列に相補的なプローブが両方に結合し、写真フィルムの異なる位置に表示されます。 すべての人は、これらの対立遺伝子の1つを母親から、もう1つを父親から受け取ります。

したがって、親子鑑定では、母親、子供(a)、父親と思われる対立遺伝子を比較するだけで十分です。 子供の父親の対立遺伝子と想定される父親の対立遺伝子の一致は、父親性を確認します 「生物学的」。 個人(犯罪者など)の身元のみを調査したい場合は、次のことを行う必要があります。 犯罪現場で得られたDNAサンプルの多型パターンをいくつかのパターンと比較します 容疑者。

DNAフラグメントの合成

多型を検出するために、ヌクレオチドリピート(2、3、またはそれ以上のグループ)が存在するDNAの領域に隣接するプライマーが使用されます。 これは、そのようなプライマーが、新しい鎖の合成を、それらが結合する部位の間に位置する繰り返しを伴うストレッチに区切ることを意味します。 このような繰り返しはSTR(短いタンデムリピート、または「連続した短い繰り返し」)と呼ばれ、それらが見つかった領域は「マイクロサテライト」と呼ばれます。

ミトコンドリアDNA

細胞の核に存在するゲノムDNAに加えて、ミトコンドリア、細胞質にある細胞小器官にもDNAがあります。 このDNAは核よりもはるかに小さく、円形の構造を持っているため、バクテリアのDNAに似ています。

法医学分析の文脈では、ミトコンドリアDNAへの関心がいくつかの理由で生じました。まず、このDNAには、その個別化を可能にする多型領域も含まれています。 第二に、子孫は母親からのみこのDNAを受け取ります。これにより、人の母系を追跡することができます。 そして第三に、このDNAは核DNAよりも分解に対して耐性があります。 したがって、大規模な災害(火災、爆発、飛行機墜落事故など)では、体を特定することがより困難な場合、ミトコンドリアDNAが分析されます。 これは遺体から抽出され、関心のあるシーケンスが兄弟または母方の祖先から取得されたシーケンスと比較されます。

DNA検査の信頼度

研究所とDNA検査機関の間で激しい議論を引き起こした1つのポイントは、アイデンティティと父性を確実に確立するために必要な多型遺伝子座の数です。 結論に使用される指標は、個人の身元と父親の両方に基づいており、分析された遺伝子座の数によって異なります。 ただし、適切な指標に到達するには、集団内の対立遺伝子の頻度を考慮する必要があります。それらが非常に一般的である場合、分析の結果は、控えめに言っても疑わしいものになります。

例として、血液型(A、B、O、およびAB)を使用できます。 対立遺伝子の組み合わせに依存するそのようなグループは、既知の頻度で世界中の集団に分布しています。 ドイツでは、46%から48%がA型の血液を持っています。 中央ユーラシア、インド、モンゴル、シベリアでは、タイプBが優勢です。 したがって、これらの地域のいずれにおいても、人口の大部分がどちらか一方を持っているため、これらの血液型を単独で使用して個人を特定することはできません。 調査された対立遺伝子がまれであることが重要です。

DNA多型(RFLP)の場合、頻度ははるかに低くなります。 例として、D10S28遺伝子座が使用されているリオデジャネイロでの父親の紛争を想像してみましょう。 プローブとして、想定される父親において、リオデジャネイロの人口の約2.8%で発生する対立遺伝子を取得することを可能にします。 市の人口が約800万人であると考えると、この値は非常に高くなります。 この値を減らすには、同じ個体の他の遺伝子座を検索する必要があります。 D2S44遺伝子座を使用した2番目の分析で、頻度が7.28%の対立遺伝子が明らかになったと想像してみてください。この割合は、リオデジャネイロにこの対立遺伝子を持つ582,000人が存在することを示しています。

しかし、何人の個人が両方の対立遺伝子を持っているでしょうか? たった16,307。 この数値は、2つの周波数の逆数(2.8 / 100 x 7.28 / 100 x 800万)を掛けることによって得られます。 もう1つのロコを使用すると、分析は別の頻度を示し、パーセンテージをさらに減らすことができます。 実際には、5〜7個のプローブを使用すると、結果が決定的になるのに十分低い値が生成されます。

ソース: ブラジルの学校- https://brasilescola.uol.com.br/biologia/sintese-fragmentos-dna.htm

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