De hogyan lehet felismerni a töredékek helyzetét? Ehhez szükséges egy „szonda”, vagyis egy radioaktív izotóppal vagy bizonyos körülmények között fényt kibocsátó gyökökkel jelölt DNS kis töredéke. DNS-fragmensként is a próba olyan szekvenciát tartalmaz, amely csak egy, a vizsgált fragmensben már ismert invariáns szekvencia egyik típusát egészíti ki, amely lehetővé teszi mindkettő megkötését.
Fényképészeti film felhasználásával felfedezik a szonda és így a töredék helyzetét. Az egyhelyes helyek esetében - amelyek a teljes genomban csak egyszer fordulnak elő - mindig két „allél” van, mivel a sejtekben (a reproduktív kivételével) minden kromoszómából egy-egy pár található. Mivel az alléloknak ugyanaz az alapszekvenciájuk és különböző méretűek, az adott szekvenciát kiegészítő szonda mindkettőhöz kötődik, és különböző helyzetekben jelennek meg a fényképészeti filmen. Minden ember az egyik ilyen allélt az anyától és egyet az apától kapja.
Ezért az apasági tesztben elég összehasonlítani az anya, gyermeke (a) és a feltételezett apa alléljeit, és a gyermek apai alléljának egybeesése a feltételezett apa alléljével megerősíti az apaságot "biológiai". Amikor csak egy személy (például bűnöző) személyazonosságát akarja kivizsgálni, akkor meg kell hasonlítsa össze a bűncselekmény helyszínén kapott DNS-minták polimorfizmusát több mintával gyanúsítottak.
DNS-fragmensek szintézise
A polimorfizmus kimutatásához olyan primereket használunk, amelyek a DNS olyan régióit szegélyezik, ahol nukleotid ismétlődések vannak (kettő, három vagy több csoportban). Ez azt jelenti, hogy az ilyen primerek az új szálak szintézisét az ismétlésekkel határolják a szakaszhoz, amelyek az általuk megkötött helyek között helyezkednek el. Az ilyen ismétléseket STR-nek (rövid tandemismétléseknek vagy „rövid ismétlések sorozatban”) nevezzük, és a régiók, ahol megtalálhatók, „mikroszatellitákként” ismertek.
mitokondriális DNS
A sejtmagban jelen lévő genomi DNS mellett a mitokondriumokban, a citoplazmában elhelyezkedő organellákban is található DNS. Ez a DNS sokkal kisebb, mint a mag, és kör alakú szerkezettel rendelkezik, ami jobban hasonlít a baktériumokéra.
Az igazságügyi elemzés összefüggésében több okból is felmerült az érdeklődés a mitokondriális DNS iránt: először is ez a DNS polimorf régiókat is tartalmaz, amelyek lehetővé teszik annak individualizálódását; másodszor, a leszármazottak csak az anyától kapják ezt a DNS-t, ami lehetővé teszi az ember anyai származásának nyomon követését; és harmadszor, ez a DNS jobban ellenáll a lebomlásnak, mint a nukleáris DNS. Így nagyobb katasztrófákban (tűzvészek, robbanások, repülőgép-szerencsétlenségek stb.), Amikor nehezebb a testek azonosítása, elemzik a mitokondriális DNS-t. Ezt kivonják a maradványokból, és az érdekes szekvenciát összehasonlítják testvérektől vagy anyai ősöktől kapott szekvenciákkal.
Ne álljon meg most... A reklám után még több van;)
A DNS-teszt magabiztosságának foka
Az egyik pont, amely intenzív vitát váltott ki a laboratóriumok és a DNS-vizsgálati ügynökségek között, az a polimorf lókuszok száma, amely az identitás és az apaság megbízható megállapításához szükséges. A következtetésekhez használt index, mind a személy azonossága, mind az apaság tekintetében, az elemzett lókuszok számától függ. Megfelelő index eléréséhez azonban figyelembe kell venni az allélok gyakoriságát a populációban: ha ezek nagyon gyakoriak, akkor az elemzések eredményei enyhén szólva is kétségesek.
Vércsoportok (A, B, O és AB) használhatók példaként. Az ilyen csoportok, amelyek az allélek kombinációjától függenek, világszerte ismert frekvenciájú populációkban oszlanak meg. Németországban 46–48% -a rendelkezik A típusú vérrel. Közép-Eurázsiában, Indiában, Mongóliában és Szibériában a B típus érvényesül. Ezért ezeknek a régióknak egyikében sem lehet ezeket a vércsoportokat elszigetelten felhasználni az egyén azonosítására, mert a lakosság nagy százalékának lenne egyikük vagy másikuk. Fontos, hogy a vizsgált allélek ritkák legyenek.
DNS polimorfizmusok (RFLP) esetén a frekvenciák sokkal alacsonyabbak. Példaként képzeljünk el egy apasági vitát Rio de Janeiróban, ahol a D10S28 lokuszt használják mint próba, amely lehetővé teszi az állítólagos apában olyan allél megszerzését, amely Rio de Janeiro lakosságának körülbelül 2,8% -ában fordul elő. Ez az érték nagyon magas, ha figyelembe vesszük, hogy a város lakossága körülbelül 8 millió lakos. Ennek az értéknek a csökkentése érdekében szükség van más lókuszok keresésére ugyanazon egyénnél. Képzeljük el, hogy egy második elemzés, a D2S44 lokusz segítségével, 7,28% -os gyakoriságú allélt tárt fel, ez olyan százalék, amely 582 000 ember létezését jelzi Rio de Janeiróban ezzel az alléllal.
De hány egyednek lenne mindkét allélja? Csak 16,307. Ezt a számot úgy kapjuk meg, hogy megszorozzuk a két frekvencia inverzét: 2,8 / 100 x 7,28 / 100 x 8 millió. Még egy lokusz használatával az elemzés újabb gyakoriságot jelez, amely lehetővé teszi a százalékos további csökkentést. A gyakorlatban öt-hét szonda használata elég alacsony értéket eredményez ahhoz, hogy az eredmény meggyőző legyen.
