डीएनए अंशों का संश्लेषण

लेकिन टुकड़ों की स्थिति को कैसे पहचाना जाए? इसके लिए, एक "जांच" का उपयोग करना आवश्यक है, अर्थात, रेडियोधर्मी आइसोटोप के साथ लेबल किए गए डीएनए का एक छोटा सा टुकड़ा या कुछ शर्तों के तहत प्रकाश का उत्सर्जन करने वाले रेडिकल के साथ। एक डीएनए खंड होने के नाते, जांच में एक अनुक्रम होता है जो अध्ययन के तहत टुकड़े में पहले से ही ज्ञात केवल एक प्रकार के अपरिवर्तनीय अनुक्रम को पूरक करता है, जो दोनों के बंधन की अनुमति देगा।

फोटोग्राफिक फिल्म के उपयोग से, जांच की स्थिति और इसलिए, टुकड़े की खोज की जाती है। एकल-साइट साइटों के मामले में - जो पूरे जीनोम में केवल एक बार होती हैं - हमेशा दो "एलील" होते हैं, क्योंकि कोशिकाओं (प्रजनन को छोड़कर) में प्रत्येक गुणसूत्र की एक जोड़ी होती है। चूंकि एलील्स में एक ही मूल अनुक्रम और विभिन्न आकार होते हैं, इसलिए उस अनुक्रम का पूरक एक जांच दोनों को बांध देगा और वे फोटोग्राफिक फिल्म पर विभिन्न स्थितियों में दिखाई देंगे। सभी लोगों को इनमें से एक एलील माता से और एक पिता से प्राप्त होता है।

इसलिए, पितृत्व परीक्षण में, माता, उसके पुत्र (ए) और कथित पिता के युग्मों की तुलना करने के लिए पर्याप्त है, और माना पिता के एलील के साथ बच्चे के पैतृक एलील का संयोग पितृत्व की पुष्टि करेगा "जैविक"। जब आप केवल किसी व्यक्ति (उदाहरण के लिए एक अपराधी) की पहचान की जांच करना चाहते हैं, तो आपको अपराध स्थल पर प्राप्त डीएनए नमूनों के बहुरूपता पैटर्न की तुलना कई के पैटर्न के साथ करें संदिग्ध।

डीएनए अंशों का संश्लेषण

बहुरूपता का पता लगाने के लिए, प्राइमर का उपयोग किया जाता है जो डीएनए के उन क्षेत्रों को झुकाते हैं जहां न्यूक्लियोटाइड दोहराव होते हैं (दो, तीन या अधिक के समूहों में)। इसका मतलब यह है कि ऐसे प्राइमर नए स्ट्रैंड्स के संश्लेषण को दोहराव के साथ खिंचाव तक सीमित करते हैं, जो उन साइटों के बीच स्थित होते हैं जिनसे वे जुड़ते हैं। इस तरह के दोहराव को एसटीआर (लघु अग्रानुक्रम दोहराव, या "श्रृंखला में लघु दोहराव") कहा जाता है, और जिन क्षेत्रों में वे पाए जाते हैं उन्हें "माइक्रोसेटेलाइट्स" के रूप में जाना जाता है।

माइटोकॉन्ड्रियल डीएनए

कोशिकाओं के नाभिक में मौजूद जीनोमिक डीएनए के अलावा, माइटोकॉन्ड्रिया में भी डीएनए होता है, साइटोप्लाज्म में स्थित ऑर्गेनेल। यह डीएनए न्यूक्लियर से काफी छोटा होता है और इसकी एक गोलाकार संरचना होती है, जो इसे बैक्टीरिया की तरह अधिक बनाती है।

फोरेंसिक विश्लेषण के संदर्भ में, माइटोकॉन्ड्रियल डीएनए में रुचि कई कारणों से उत्पन्न हुई: सबसे पहले, इस डीएनए में बहुरूपी क्षेत्र भी शामिल हैं जो इसके वैयक्तिकरण की अनुमति देते हैं; दूसरा, वंशज इस डीएनए को केवल मां से प्राप्त करते हैं, जिससे किसी व्यक्ति के मातृ वंश का पता लगाना संभव हो जाता है; और तीसरा, यह डीएनए परमाणु डीएनए की तुलना में क्षरण के प्रति अधिक प्रतिरोधी है। इस प्रकार, बड़ी आपदाओं (आग, विस्फोट, विमान दुर्घटना, आदि) में, जब निकायों की पहचान करना अधिक कठिन होता है, तो माइटोकॉन्ड्रियल डीएनए का विश्लेषण किया जाता है। यह अवशेषों से निकाला जाता है और ब्याज के अनुक्रम की तुलना भाई-बहनों या मातृ पूर्वजों से प्राप्त अनुक्रमों से की जाती है।

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डीएनए परीक्षण के आत्मविश्वास की डिग्री

एक बिंदु जिसने प्रयोगशालाओं और डीएनए परीक्षण एजेंसियों के बीच गहन चर्चा उत्पन्न की है, वह है पहचान और पितृत्व को मज़बूती से स्थापित करने के लिए आवश्यक बहुरूपी लोकी की संख्या। निष्कर्ष के लिए इस्तेमाल किया जाने वाला सूचकांक, व्यक्ति की पहचान और पितृत्व दोनों पर, विश्लेषण किए गए लोकी की संख्या पर निर्भर करता है। एक पर्याप्त सूचकांक पर पहुंचने के लिए, हालांकि, जनसंख्या में एलील की आवृत्ति को ध्यान में रखना आवश्यक है: यदि वे बहुत सामान्य हैं, तो विश्लेषण के परिणाम कम से कम, संदिग्ध होंगे।

एक उदाहरण के रूप में रक्त समूह (ए, बी, ओ और एबी) का उपयोग किया जा सकता है। ऐसे समूह, जो युग्मविकल्पियों के संयोजन पर निर्भर करते हैं, ज्ञात आवृत्तियों के साथ दुनिया भर की आबादी में वितरित किए जाते हैं। जर्मनी में ४६% से ४८% रक्त टाइप ए है। मध्य यूरेशिया, भारत, मंगोलिया और साइबेरिया में, टाइप बी प्रचलित है। इसलिए, इनमें से किसी भी क्षेत्र में, इन रक्त समूहों का उपयोग किसी व्यक्ति की पहचान के लिए अलगाव में नहीं किया जा सकता है, क्योंकि आबादी के एक बड़े प्रतिशत में एक या दूसरे होंगे। यह महत्वपूर्ण है कि जांच किए गए एलील दुर्लभ हैं।

डीएनए बहुरूपता (RFLPs) के मामले में, आवृत्तियाँ बहुत कम होती हैं। एक उदाहरण के रूप में, आइए रियो डी जनेरियो में पितृत्व विवाद की कल्पना करें जहां D10S28 लोकस का उपयोग किया जाता है एक जांच के रूप में, कथित पिता में, एक एलील प्राप्त करने की अनुमति देता है, जो रियो डी जनेरियो की लगभग 2.8% आबादी में होता है। यह मान बहुत अधिक है यदि हम विचार करें कि शहर की जनसंख्या लगभग 8 मिलियन निवासी है। इस मान को कम करने के लिए, उसी व्यक्ति में अन्य लोकी की खोज करना आवश्यक है। आइए कल्पना करें कि D2S44 ठिकाने का उपयोग करते हुए एक दूसरे विश्लेषण ने 7.28% की आवृत्ति के साथ एक एलील का खुलासा किया, एक प्रतिशत जो इस एलील के साथ रियो डी जनेरियो में 582,000 लोगों के अस्तित्व को इंगित करता है।

लेकिन कितने व्यक्तियों में दोनों युग्मविकल्पी होंगे? केवल 16,307। यह संख्या दो आवृत्तियों के व्युत्क्रम को गुणा करके प्राप्त की जाती है: 2.8/100 x 7.28/100 x 8 मिलियन। एक और स्थान का उपयोग करते हुए, विश्लेषण एक और आवृत्ति का संकेत देगा, जिससे आप प्रतिशत को और कम कर सकते हैं। व्यवहार में, पांच से सात जांचों का उपयोग परिणाम के निर्णायक होने के लिए काफी कम मान उत्पन्न करता है।