ADN recombinant sont des molécules d'ADN qui ont des fragments d'ADN dérivés de deux sources ou plus, généralement d'espèces différentes.
LES clonage moléculaire c'est la technique centrale de la méthodologie de l'ADN recombinant et consiste en le transfert d'un gène d'un organisme à un autre, c'est-à-dire la recombinaison d'ADN de différentes sources.
Technologie de l'ADN recombinant
La procédure implique généralement la isolement d'un gène humain à potentiel thérapeutique (ex. insuline) et l'introduction de ce gène dans une cellule animale, bactérienne ou de levure.
Grâce à l'utilisation de protéines appelées les enzymes de restriction, des gènes individuels sont isolés de l'ADN humain et insérés dans de petits morceaux d'ADN coupés avec la même enzyme, appelée plasmides.
Le plasmide recombinant est ensuite inséré dans une cellule animale, bactérienne ou de levure, dans un processus appelé transformation.
Les gènes de résistance aux médicaments, qui se trouvent également sur le plasmide, sélectionnent les cellules transformées des cellules non transformées.
Une population pure de cellules recombinantes est ensuite établie par le processus de clonage, où une seule cellule sélectionnée donnera naissance à une population de clones.
À la fin du processus, toutes les cellules résultantes devraient contenir une copie du plasmide portant le gène humain inséré.
Après l'insertion du gène et de la cellule clonée, les cellules sont ensuite induites pour exprimer le gène humain.
Applications de la technologie de l'ADN recombinant
- Production de substances utiles telles que l'insuline humaine, l'hormone de croissance, les vaccins, les enzymes industrielles ;
- Étude des mécanismes de réplication et d'expression des gènes ;
- enquête de paternité;
- Diagnostic des maladies génétiques et infectieuses;
- thérapie génique;
- Transgénique.
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