Chromatografie je proces oddělování a identifikace složek směsi.
Tato technika je založena na migraci sloučenin ze směsi, které mají různé interakce ve dvou fázích.
- Mobilní fáze: fáze, ve které izolované složky „procházejí“ kapalným rozpouštědlem, kterým může být kapalina nebo plyn.
- stacionární fáze: pevná fáze, ve které se oddělená nebo identifikovaná složka fixuje na povrchu jiného kapalného nebo pevného materiálu.
Abyste porozuměli chromatografii, potřebujete znát dva základní pojmy:
- eluce: je chromatografický běh.
- eluent: je to mobilní fáze, typ rozpouštědla, které bude interagovat se vzorky a podporovat separaci složek.
Chromatografický proces spočívá v průchodu mobilní fáze přes stacionární fázi, uvnitř kolony nebo na desku. Složky směsi jsou tedy odděleny rozdílem afinity mezi dvěma fázemi.
Každá ze složek směsi je selektivně zadržována stacionární fází, což vede k rozdílné migraci těchto složek.
Chromatografie slouží k identifikaci látek, čištění sloučenin a separaci složek ze směsí.
Pomocí chromatografie je možné oddělit inkoustové složky od per
Podívejte se, jak provést tento experiment na: Chemické experimenty
Typy chromatografie
Typy chromatografie se dělí podle následujících kritérií:
Fyzikální forma chromatografického systému:
1. Sloupcová chromatografie
Sloupcová chromatografie je nejstarší chromatografickou technikou. Jedná se o techniku pro oddělení složek mezi dvěma fázemi, pevnou a kapalnou, na základě schopnosti adsorpce a rozpustnost.
Proces probíhá ve skleněné nebo kovové koloně, obvykle s kohoutkem dole. Kolona je naplněna vhodným adsorbentem, který umožní tok rozpouštědla.
Sloupcová chromatografie
Směs se poté vnese na kolonu s méně polárním eluentem. Pro zvýšení jejich polarity a následně nosné síly více polárních látek se používá souvislá řada několika eluentů.
Různé složky směsi se tedy budou pohybovat různými rychlostmi v závislosti na jejich afinitě k adsorbentu a eluentu. To umožňuje oddělení součástí.
2. planární chromatografie
Planární chromatografie zahrnuje papírovou chromatografii a chromatografii na tenké vrstvě:
- Chromatografie na papíře: je technika pro kapalinu-kapalinu, při které je jeden z nich připevněn k pevné podložce. Přijímá tento název, protože separace a identifikace složek směsi probíhá na povrchu filtračního papíru, což je stacionární fáze.
- Chromatografie na tenké vrstvě: je technika pro kapalinu-pevnou látku, při které kapalná fáze stoupá přes tenkou vrstvu adsorbentu na nosiči, obvykle skleněné desce umístěné uvnitř uzavřené nádoby. Při stoupání bude rozpouštědlo táhnout více sloučenin, které ve stacionární fázi interagovaly méně. To způsobí oddělení více adsorbovaných komponent.
Chromatografie na papíře
Použitá mobilní fáze:
1. Plynová chromatografie
Plynová chromatografie je proces separace složek směsi přes mobilní plynnou fázi přes rozpouštědlo.
Tato metoda probíhá v úzké trubce, kterou procházejí složky směsi proudem plynu, který představuje mobilní fázi, v proudu kolonového typu. Stacionární fázi představuje trubice.
Faktory, které podporují separaci složek, jsou: chemická struktura sloučeniny, stacionární fáze a teplota kolony.
Kroky plynové chromatografie
2. kapalinová chromatografie
V kapalinové chromatografii je stacionární fáze tvořena pevnými částicemi uspořádanými ve sloupci, kterým prochází mobilní fáze.
Kapalinová chromatografie zahrnuje klasickou kapalinovou chromatografii a vysoce účinnou kapalinovou chromatografii:
- Klasická kapalinová chromatografie: sloupec je obvykle vyplněn pouze jednou, protože část vzorku se obvykle nevratně adsorbuje.
- Vysoce účinná kapalinová chromatografie: je technika, která používá vysokotlaká čerpadla k eluci mobilní fáze. To umožňuje mobilní fázi migrovat přiměřenou rychlostí skrz kolonu. Můžete tak provést analýzu více vzorků v krátké době. Vyžaduje však specifické vybavení.
Kroky kapalinové chromatografie
3. Superkritická chromatografie
Superkritická chromatografie je charakterizována použitím tlakové páry v mobilní fázi nad její kritickou teplotu.
Nejpoužívanějším superkritickým eluentem je oxid uhličitý.
Použitá stacionární fáze:
V závislosti na použité stacionární fázi může být chromatografie kapalná nebo plynná:
- kapalná stacionární fáze: kapalina je adsorbována na pevnou podložku nebo na ní znehybněna.
- Pevná stacionární fáze: když je pevná fáze pevná.
Přečtěte si také:
- Separace směsí
- Homogenní a heterogenní směsi
- Rozpuštěná látka a rozpouštědlo
- chemické roztoky
- Rozpustnost
