ولكن كيف نتعرف على موضع الشظايا؟ لهذا ، من الضروري استخدام "مسبار" ، أي جزء صغير من الحمض النووي المسمى بنظير مشع أو بجذر ينبعث منه الضوء في ظل ظروف معينة. نظرًا لكونه أيضًا جزء من الحمض النووي ، يحتوي المسبار على تسلسل يكمل نوعًا واحدًا فقط من التسلسل الثابت المعروف بالفعل في الجزء قيد الدراسة ، والذي سيسمح بربط كليهما.
باستخدام فيلم فوتوغرافي ، يتم اكتشاف موضع المسبار ، وبالتالي ، الجزء. في حالة المواقع أحادية الموقع - التي تحدث مرة واحدة فقط في الجينوم بأكمله - يوجد دائمًا "أليلين" ، لأن الخلايا (باستثناء الخلايا الإنجابية) تحتوي على زوج من كل كروموسوم. نظرًا لأن الأليلات لها نفس التسلسل الأساسي والأحجام المختلفة ، فإن مسبارًا مكملًا لهذا التسلسل سيرتبط بكليهما وسيظهر في مواضع مختلفة في فيلم التصوير الفوتوغرافي. يتلقى جميع الناس واحدًا من هذه الأليلات من الأم والآخر من الأب.
لذلك ، في اختبار الأبوة ، يكفي مقارنة أليلات الأم وطفلها (أ) والأب المفترض ، و مصادفة أليل الطفل الأبوي مع أليل الأب المفترض سيؤكد الأبوة "بيولوجي". عندما تريد فقط التحقيق في هوية شخص (مجرم ، على سبيل المثال) ، عليك القيام بذلك قارن نمط تعدد الأشكال لعينات الحمض النووي التي تم الحصول عليها من مسرح الجريمة بأنماط عديدة المشتبه بهم.
توليف شظايا الحمض النووي
للكشف عن تعدد الأشكال ، يتم استخدام البادئات التي تحيط بمناطق الحمض النووي حيث يوجد تكرار النيوكليوتيدات (في مجموعات من اثنين أو ثلاثة أو أكثر). هذا يعني أن مثل هذه البادئات تحدد توليف الخيوط الجديدة إلى الامتداد مع التكرارات ، الموجودة بين المواقع التي ترتبط بها. تسمى هذه التكرارات STR (التكرارات الترادفية القصيرة ، أو "التكرارات القصيرة في السلسلة") ، وتُعرف المناطق التي توجد فيها باسم "السواتل الصغيرة".
الحمض النووي للميتوكوندريا
بالإضافة إلى الحمض النووي الجيني الموجود في نواة الخلايا ، يوجد أيضًا DNA في الميتوكوندريا ، وهي عضيات موجودة في السيتوبلازم. هذا الحمض النووي أصغر بكثير من النواة وله بنية دائرية ، مما يجعله أشبه ببنية البكتيريا.
في سياق تحليل الطب الشرعي ، نشأ الاهتمام بالحمض النووي للميتوكوندريا لعدة أسباب: أولاً ، يحتوي هذا الحمض النووي أيضًا على مناطق متعددة الأشكال تسمح بإضفاء الطابع الفردي عليه ؛ ثانيًا ، يتلقى الأحفاد هذا الحمض النووي من الأم فقط ، مما يجعل من الممكن تتبع نسب الأم لدى الشخص ؛ وثالثًا ، هذا الحمض النووي أكثر مقاومة للتحلل من الحمض النووي. وبالتالي ، في حالات الكوارث الكبرى (الحرائق والانفجارات وتحطم الطائرات وما إلى ذلك) ، عندما يكون التعرف على الجثث أكثر صعوبة ، يتم تحليل الحمض النووي للميتوكوندريا. يتم استخراج هذا من الرفات ومقارنة تسلسل الفائدة مع التسلسلات التي تم الحصول عليها من الأشقاء أو أسلاف الأمهات.
لا تتوقف الان... هناك المزيد بعد الإعلان ؛)
درجة الثقة في اختبار الحمض النووي
إحدى النقاط التي أثارت نقاشًا مكثفًا بين المختبرات ووكالات اختبار الحمض النووي هي عدد المواقع متعددة الأشكال اللازمة لتحديد الهوية والأبوة بشكل موثوق. يعتمد الفهرس المستخدم للاستنتاجات ، سواء على هوية الشخص أو الأبوة ، على عدد المواقع التي تم تحليلها. ومع ذلك ، للوصول إلى مؤشر مناسب ، من الضروري مراعاة تواتر الأليلات في المجتمع: إذا كانت شائعة جدًا ، فستكون نتائج التحليلات ، على أقل تقدير ، مشكوك فيها.
يمكن استخدام فصائل الدم (A و B و O و AB) كمثال. هذه المجموعات ، التي تعتمد على مزيج الأليلات ، موزعة في مجموعات سكانية في جميع أنحاء العالم ذات ترددات معروفة. في ألمانيا ، 46٪ إلى 48٪ لديهم فصيلة الدم A. في وسط أوراسيا والهند ومنغوليا وسيبيريا ، يسود النوع ب. لذلك ، في أي من هذه المناطق ، لا يمكن استخدام مجموعات الدم هذه منعزلة لتحديد هوية الفرد ، لأن نسبة كبيرة من السكان سيكون لديهم واحدة أو أخرى. من المهم أن تكون الأليلات التي تم فحصها نادرة.
في حالة تعدد أشكال الحمض النووي (RFLPs) ، تكون الترددات أقل بكثير. على سبيل المثال ، دعنا نتخيل نزاعًا حول الأبوة في ريو دي جانيرو حيث يتم استخدام موضع D10S28 كمسبار ، يسمح بالحصول ، في الأب المفترض ، على أليل يحدث في حوالي 2.8 ٪ من سكان ريو دي جانيرو. هذه القيمة عالية جدًا إذا اعتبرنا أن عدد سكان المدينة يبلغ حوالي 8 ملايين نسمة. لتقليل هذه القيمة ، من الضروري البحث عن مواقع أخرى في نفس الفرد. لنتخيل أن التحليل الثاني ، باستخدام موضع D2S44 ، كشف عن أليل بتكرار 7.28٪ ، وهي نسبة تشير إلى وجود 582 ألف شخص في ريو دي جانيرو بهذا الأليل.
ولكن كم عدد الأفراد الذين سيكون لديهم كلا الأليلين؟ فقط 16307. يتم الحصول على هذا الرقم بضرب معكوس الترددين: 2.8 / 100 × 7.28 / 100 × 8 مليون. باستخدام موضع آخر ، سيشير التحليل إلى تكرار آخر ، مما يسمح لك بتقليل النسبة المئوية بشكل أكبر. من الناحية العملية ، فإن استخدام خمسة إلى سبعة مجسات يولد قيمة منخفضة بما يكفي لتكون النتيجة حاسمة.
